Lazer Taramalı Konfokal Mikroskop araştırmacılara
floresan veya yansıtıcı problar ile işaretlenmiş kemik, beyin ve
diğer benzeri dokuların oldukça kalın kesitleri, gelişmekte olan
embriyolar gibi küçük organizmalar ve bütün haldeki hücre örnekleri
ile çalışma imkanı sağlar. Bu teknoloji araştırmacılara ulaşılabilecek
en yüksek ışık mikroskobu çözünürlüğü ile hücre altı yapılar, fonksiyonları
ve hücre/organizma yapısının temiz bir şekilde görüntülenmesini
sağlar. Bu işlem tek veya çoklu işaretlenmiş örneklere uygulanır.Konfokal
mikroskobun avantajı tek bir plandan gelen ışığı toplayabilmesidir.Objektifteki
optiklerin optimal kullanımı için bir lazer ışını gönderilir. x-y
yansıtma mekanizması ile bu ışın tarama ışınına çevrilir ve objektif
lensi yardımıyla floresan işaretlenmiş örnek üzerindeki tek bir
küçük noktaya odaklanır. Yansıtılan lazer ışını ve örnek tarafından
yayılan floresan ışık karışımı aynı objektif ile tutularak dikroik
ayna ile bir fotodedektör üzerine odaklanır. Floresan işaretlenmiş
örnek tarafından yayılan ışık fotomultiplier tüpe gönderilirken
yansıtılan ışık dikroik ayna ile ayrıştırılır. Fotodedektör önünde
bulunan konfokal açıklık örnek üzerindeki tek bir noktadan yayılan
floresan ışığın toplanmasını sağlar. Bu şekilde odaklanan noktanın
etrafından yayılan ışığın toplanması azaltılır. Bu özellikle kalın
kesitlerle çalışırken önemlidir. Konfokal açıklığın ortasına odaklanan
nokta konfokal spot olarak tanımlanır. Sonuç olarak taranan örnek
yüksek çözünürlükte görüntülenir. Optik kesit alma xy düzleminde
veya xz, yz dikey düzlemlerinde gerçekleştirilebilir. x ve y düzlemlerinin
yanısıra z ekseninde tarama fokal planın yandan görüntülenmesi etkisini
yaratır. Ayrıca gerçek 3 boyutlu veri setleri toplanabilir. Fokal
düzlemlerden elde edilen optik kesit katmanları tekrar üst üste
yapılandırılarak 3 boyutlu görüntü üretilir. Moleküler Biyoloji
Biyoteknoloji AR-GE Birimimizde Zeiss LSM 510 Lazer Taramalı Konfokal
Mikroskop, görüntü analizi, işlenmesi ve bu görüntülerin 3 boyutlu
yapılandırabilmesi için gerekli yazılım paketi mevcuttur.
Laboratuarımız LSM 510 Lazer Taramalı Konfokal Mikroskop
sisteminde 3 lazer kaynağı bulunmaktadır.